生物传感器技术是在生命科学和信息科学的基础上发展而来,涉及生物、物理、电子等学科,它包括分子识别和转换器两部分,是用固定化的生物敏感材料(如酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、微生物、细胞、组织、核酸等生物活性物质)作为识别元件,采用适当的理化换能器(如氧电极、光敏管、场效应管、压电晶体等)及信号放大器作为分析工具所构成的检测系统,在临床诊断、药物分析、生物技术、生物芯片等领域有着广泛的应用前景。
1具有双酶活性的Fe-N-C纳米酶比色检测H2O2和谷胱甘肽
H2O2和谷胱甘肽都是肿瘤微环境高表达的生物小分子,其在肿瘤组织中含量显著高于正常组织,对H2O2和谷胱甘肽的快速及时准确检测可以间接筛查肿瘤。在本研究中,我们以廉价无毒的有机小分子甲酰胺为氮源和碳源,通过一步水热法制备了Fe-N-C纳米酶。TEM、XPS、XRD和Raman光谱证实了Fe-N-C的成功合成,同时,发现其与天然辣根过氧化物酶中的活性位点氯高血红素结构类似,并表现出类过氧化物酶和氧化物酶双重类酶活性,Fe-N-C对底物H2O2和TMB的亲和力与最大催化反应速率都优于天然辣根过氧化物酶。利用Fe-N-C的类过氧化物酶活性,我们构建了一种比色传感器检测H2O2和谷胱甘肽,该传感器对H2O2和谷胱甘肽的线性响应范围分别为10-600 μM和100-400 μM,检测限分别为4.36 μM和78.33 μM (S/N=3),能够满足血清中H2O2和谷胱甘肽的检测,且对谷胱甘肽有着良好的选择性。将Fe-N-C封装在琼脂凝胶中,即可得到检测谷胱甘肽的便携式试剂盒,实现对谷胱甘肽的半定量实时检测。
图1. Fe-N-C对H2O2和谷胱甘肽的检测结果